目的基因片段與載體連接的過程中，連接酶的最適活性溫度是多少

數(shù)量一般在 目的基因：載體=5:1-10:1。
雙酶切的話，目的基因多加點(diǎn)沒關(guān)系。目的基因越小，越往10:1上靠；目的基因片段大，反之。
不過現(xiàn)在有很多種連接方法，體系不同，具體你還是要參考連接酶的說明書的。

連接酶的最佳活性溫度是37℃，但做粘性末端連接時(shí)，為了提高連接的效率，常常用較低的溫度，原因在于低溫時(shí)更有利于保持粘性末端的配對(duì)，因?yàn)闇囟仍礁?，則粘性末端的互補(bǔ)配對(duì)越易于解鏈，從而不利于連接，也就是說，盡管37℃時(shí)連接酶的活性比較高，但高溫同樣會(huì)導(dǎo)致粘性末端配對(duì)的破壞，從而減低了連接的效率。