怎樣將一個質粒轉入細胞，包括質粒的培養(yǎng)，提取，PCR ,電泳和結果分析。

同樣的問題,我也正經(jīng)歷著,別著急慢慢分析原因. 如果你做得是質粒的構建,我想根本的原因是沒有連接上,那得重新做,考慮連接的問題. 對于你的那個5天得菌液,原則上說菌液放久了,質?？赡軙G失,你可以重新...

白細胞包括5種:分別是中性粒細胞、嗜酸性粒細胞丶嗜堿性粒細胞、以上這3種叫粒細胞、剩余的2種沒有顆粒、分別是淋巴細胞和單核細胞。

pET 30a 在菌內是偏保守的質粒，拷貝數(shù)比較低，建議你做大提質粒，否則帶很暗，看不清。 還有，既然你已經(jīng)菌液PCR有條帶了，為什么不誘導表達做western來驗證下有沒有表達產(chǎn)物？

先一步步找原因。是實驗步聚問題，還是試劑盒的問題， 如果是試劑盒的問題，推薦您用鼎國生物的。 價格應該還實惠點。

菌檢條帶有多大？如果是小條帶，小心不要跟Dimer搞混。我還有遇見測序正確的東西P不出的，最后只能換克隆。

都有可能 你可以多做幾個對照,如空載體轉化、空細胞涂板等等，幫助縮問題小范圍 你可以詢問實驗室其他人員，看看酶是否有問題，感受態(tài)是否有問題，抗生素是否有問題，等等 按你給的線索，菌落很少，很有可能是切...

同樣的問題，我也正經(jīng)歷著，別著急慢慢分析原因。 如果你做得是質粒的構建，我想根本的原因是沒有連接上，那得重新做，考慮連接的問題。 對于你的那個5天得菌液，原則上說菌液放久了，質粒可能會丟失，你可以重新...

你做完菌落PCR以后，電泳完要看看是不是你需要的那一條帶，如果這條帶是你要的話，你就要拿你用來菌落PCR的菌液拿去測序就可以了，因為我平時也是做菌落PCR，而且提取質粒是檢測不出來的，但是菌落PCR以...

設計一對引物，針對基因兩端（覆蓋酶切位點），在上游引物中酶切位點后的一段序列中添加一個堿基，擴增以后，酶切產(chǎn)物和空載體，再連接一遍，轉化，小提拿去測序。 最好上游換另一個內切酶位點，這樣方便雙酶切檢測...

構建載體就是把目標DNA、載體、DNA連接酶、酶的buffer放到一起，然后4度連接過夜就行了。上面各個東西的用量，你可以參考連接酶的說明書。如果你是想連T載體的話，就可以直接拿PCR產(chǎn)物和載體連，如...