外源性基因與載體的連接方式哪四種

2022-09-21 20:40

1個回答
還真是個問題,我的理解可能不是你要的答案。
首先是T,A連接,就是現(xiàn)在通常使用的T載體,一般的PCR產(chǎn)物都在兩端加個A,這樣T,A相配,T4連接酶可以把他們連在一起。
第二,粘性酶切位點(diǎn)連接,把載體和外源基因用相同的酶進(jìn)行酶切(雙酶切,或者單酶切都可以)回收相應(yīng)的片段,用酶切出來的粘性末端進(jìn)行配對,T4連接酶進(jìn)行連接。
第三,平末端連接,也是用酶切,平末端也可以用T4連接酶連接,不過連接效率低的很。
第四,同源重組,用一個含有目的基因的載體A和另外一個載體B共轉(zhuǎn)染(轉(zhuǎn)化)宿主,可以通過同源重組產(chǎn)生包含目的基因的B載體。多用在病毒載體和重組病毒的構(gòu)建上。
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外源基因連接T載體導(dǎo)入到大腸桿菌,那么外源基因能在
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可以的,因?yàn)樗厦嬗袉幼印?但是T載體一般不用做表達(dá)載體,因?yàn)樗强縏-A連接的(T載體上含多個T,PCR產(chǎn)物含多聚A),讀碼框未必正確,所以一般是用作中間過渡的載體,后續(xù)要把這段基因切下來(你的擴(kuò)...
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載體上鏈接外源基因時怎么補(bǔ)齊堿基
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對于一個細(xì)胞來說,內(nèi)源DNA是其基因組的序列(本身生物就有的DNA),而外源的DNA是通過基因工程導(dǎo)入的其他物種或細(xì)胞的DNA,也可以是人工合成的一段DNA。
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1個回答2023-07-04 05:45
同源重組,粘性末端連接,平末端連接
基因工程中,載體與載體連接物,目的基因與目的基因連接物,目的基因與載體連接物分別是指什么,滿意的話
1個回答2023-04-25 08:51
經(jīng)過同一種限制性內(nèi)切酶切割后會產(chǎn)生相同的粘性末端,所以目的基因可與目的基因連接,載體可與載體連接,也有目的基因和載體連接。 用限制性內(nèi)切酶切了以后,讓片段自己連接,就會出現(xiàn)三種連接方式,然后我們選擇...
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第二小題答案中的載體與載體連接物,目的基因與載體連接物,目的基因與目的基因連接物分別是指圖中哪部分
1個回答2022-12-16 08:12
如果用同一種限制酶切割載體兩端或目的基因兩端,那么載體兩端由于有相同的黏性末端,自身就可以連起來,同樣,目的基因兩端也就能夠連起來,這樣就達(dá)不到將目的基因連接到載體的目的。
外源基因連接T載體導(dǎo)入到大腸桿菌,那么外源基因能在大腸桿菌中表達(dá)嗎?
3個回答2022-09-12 01:49
可以的,因?yàn)樗厦嬗袉幼覶7/SP6(哪個我忘記了)。 但是T載體一般不用做表達(dá)載體,因?yàn)樗强縏-A連接的(T載體上含多個T,PCR產(chǎn)物含多聚A),讀碼框未必正確,所以一般是用作中間過渡的載體,后...
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