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怎樣克隆基因或是克隆基因的一般步驟是什么？

2022-09-09 10:50

1個(gè)回答

2022-09-09 15:16

一般情況下有兩種方法：一、反轉(zhuǎn)錄法：用已知的單鏈mRNA反轉(zhuǎn)錄出一條單鏈的DNA，再用堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成雙鏈DNA。二、用已知的蛋白質(zhì)的多肽鏈推測(cè)出單鏈mRNA（一個(gè)氨基酸對(duì)應(yīng)相應(yīng)的密碼子）上堿基的排列順序，再根據(jù)單鏈mRNA上堿基的排列順序推測(cè)出一條單鏈DNA上堿基的排列順序，再推測(cè)出雙鏈DNA上堿基的組成，進(jìn)行人工合成（用PCR儀）。

相關(guān)問(wèn)答

基因克隆的基本步驟有哪些

1個(gè)回答2022-12-05 19:36

　　選擇目的基因,并設(shè)計(jì)相應(yīng)引物；　　用引物PCR擴(kuò)增目的基因片段；　　選擇合適（抗性標(biāo)記、酶切位點(diǎn)等）的克隆載體（為了保真擴(kuò)增）,并將PCR片段連接入克隆載體中；（一般用Taq酶的PCR產(chǎn)物在末...

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基因克隆載體連接步驟

1個(gè)回答2023-01-18 05:40

基因克隆的步驟： 1、獲取目的基因； 2、將目的基因與載體連接； 3、重組體載入受體細(xì)胞； 4、重組體的篩選、克隆。具體到載體連接這一步，將酶切后的載體與目的片段加入相應(yīng)的連接體系中就可以了。

基因的克隆與表達(dá)的實(shí)驗(yàn)步驟

1個(gè)回答2023-01-03 06:20

你手上需要有要克隆的基因，然后再根據(jù)你要表達(dá)的表達(dá)系統(tǒng)選擇表達(dá)載體。剩下的事就是將基因克隆到該載體上，常用的方法就是酶切連接，然后PCR及跑電泳，再測(cè)序。最終確定獲得了正確序列的克隆后，再做表達(dá)。在挑...

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基因克隆不出來(lái)，為什么

1個(gè)回答2022-09-01 13:52

基因克隆是70年代發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)具有革命性的研究技術(shù)，可概括為∶分、切、連、轉(zhuǎn)、選。最終目的在于通過(guò)相應(yīng)技術(shù)手段，將目的基因?qū)爰闹骷?xì)胞，在宿主細(xì)胞內(nèi)目的基因被大量的復(fù)制。

你好，你克隆過(guò)未知的基因吧？我也要克隆一個(gè)未知基因。我有以下疑問(wèn)：1，我克隆魚的一個(gè)未知基因。

1個(gè)回答2022-10-28 23:30

你這個(gè)應(yīng)該比較簡(jiǎn)單吧，80%的同源性設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物應(yīng)該成功率是比較高的，前提是你要做的這種魚中有這個(gè)基因。 5對(duì)夠不夠不好說(shuō)，這東西的看運(yùn)氣，但是我覺(jué)的應(yīng)該夠了。拿全長(zhǎng)看怎么拿了，如果你PCR引物設(shè)...

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怎樣克隆一個(gè)目的基因?

2個(gè)回答2022-09-14 09:25

要有目的基因、引物、DNTP、去離子水、Taq酶、以合適的濃度加到離心管里，在PCR儀上克隆

基因克隆探針

1個(gè)回答2023-07-16 07:41

這種探針是利用已知基因經(jīng)過(guò)互補(bǔ)配對(duì)設(shè)計(jì)的單鏈DNA

為什么我們基因克隆老失??？

1個(gè)回答2023-01-19 02:19

1 建議你直接切PCR產(chǎn)物，在酶切位點(diǎn)兩端加2~3個(gè)保護(hù)堿基再切。這樣避免兩次純化的麻煩。我都是這么做的。 2 你的T載體連接成功了么？就是有沒(méi)有拿到重組T載體？ 3 你用的是Taq還是高保真聚合酶？...

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為什么我們基因克隆老失敗