影響克隆基因表達(dá)的因素有哪些？

一般情況下有兩種方法：一、反轉(zhuǎn)錄法：用已知的單鏈mRNA反轉(zhuǎn)錄出一條單鏈的DNA，再用堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成雙鏈DNA。二、用已知的蛋白質(zhì)的多肽鏈推測(cè)出單鏈mRNA（一個(gè)氨基酸對(duì)應(yīng)相應(yīng)的密碼子）上堿基的...

如果不克隆如載體，基因本身是一段DNA，很難轉(zhuǎn)染到受體細(xì)胞中，即使轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，也不能篩選轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。

基因克隆是70年代發(fā)展起來的一項(xiàng)具有革命性的研究技術(shù)，可概括為∶分、切、連、轉(zhuǎn)、選。最終目的在于通過相應(yīng)技術(shù)手段，將目的基因?qū)爰闹骷?xì)胞，在宿主細(xì)胞內(nèi)目的基因被大量的復(fù)制。

你手上需要有要克隆的基因，然后再根據(jù)你要表達(dá)的表達(dá)系統(tǒng)選擇表達(dá)載體。剩下的事就是將基因克隆到該載體上，常用的方法就是酶切連接，然后PCR及跑電泳，再測(cè)序。最終確定獲得了正確序列的克隆后，再做表達(dá)。在挑...

1 克隆的序列問題，發(fā)生突變等，導(dǎo)致提前終止等； 2 構(gòu)建載體時(shí)，發(fā)生移碼；載體的功能元件不完整(啟動(dòng)子，終止子等) 3 基因沉默，形成包含體等（看你在那種系統(tǒng)表達(dá)，有很多可能性了，具體問題具體分析）

　　選擇目的基因,并設(shè)計(jì)相應(yīng)引物； 　　用引物PCR擴(kuò)增目的基因片段； 　　選擇合適（抗性標(biāo)記、酶切位點(diǎn)等）的克隆載體（為了保真擴(kuò)增）,并將PCR片段連接入克隆載體中；（一般用Taq酶的PCR產(chǎn)物在末...

1電機(jī)軸承壞，換。2離合器壞，換。3皮帶有橫項(xiàng)斷口，換。

你這個(gè)應(yīng)該比較簡(jiǎn)單吧，80%的同源性設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物應(yīng)該成功率是比較高的，前提是你要做的這種魚中有這個(gè)基因。 5對(duì)夠不夠不好說，這東西的看運(yùn)氣，但是我覺的應(yīng)該夠了。 拿全長(zhǎng)看怎么拿了 ，如果你PCR引物設(shè)...

要有目的基因、引物、DNTP、去離子水、Taq酶、以合適的濃度加到離心管里，在PCR儀上克隆

這種探針是利用已知基因經(jīng)過互補(bǔ)配對(duì)設(shè)計(jì)的單鏈DNA