請問PCR產(chǎn)物直接測序和克隆后再測序有什么區(qū)別，用PCR產(chǎn)物直接測序不是更省時間嗎，省得再連到載體上了啊

模板會影響測序

PCR產(chǎn)物直接測序，引物端約有幾十個堿基是測不出來的，如果你恰好關(guān)注這個位置，那么或者從另一端測通（你的產(chǎn)物不長），或者克隆測序
此外，很多時候由于PCR產(chǎn)物不專一，直接測序效果不好，而克隆測序沒這個問題，測序效果好于PCR產(chǎn)物測序。不過，如果你使用普通taq酶，PCR過程中會引入錯誤，用產(chǎn)物直接測序會掩蓋這些錯誤，但克隆測序時則會保留這些錯誤。

PCR直接測序會存在或多或少的套峰，所以通常都采用雙向引物測序，通過堿基互補(bǔ)原則來彌補(bǔ)單向沒測出來的地方?？寺『鬁y序就非常準(zhǔn)確了，而且有時候PCR跑出來有雜帶的話就必須克隆后再拿去測序了。我也涉入分子不久，希望回答能幫到你。