基因的組織表達譜需要哪些步驟或者需要做哪些實驗,就可以搞出結(jié)果來?組織表達譜難做嗎?

2022-09-27 00:25

2個回答
基因的表達分為mRNA以及蛋白兩個不同的層面,你需要明確的是哪個層面的表達譜。
不管是哪個層面,你需要確定組織,根據(jù)組織的狀況確定處理/運輸/保存組織的方法,
再次確定從組織中提取DNA、RNA或蛋白質(zhì)的方法,
最后將你的樣品(DNA、RNA或蛋白質(zhì))送到專業(yè)進行表達譜測定的公司進行測定,
或者你們實驗室有相關(guān)儀器,自己做也行。
給公司做,公司會負責幫你分析獲得的數(shù)據(jù)并給出最終的結(jié)果,
自己做,自己分析數(shù)據(jù)獲得結(jié)果。
步驟如下:
1、材料處理:對照、處理,要有生物重復;
2、采樣:按照一定的時間間隔或者固定的有最大差異的時間點采樣;通常需要嚴格區(qū)分不同組織,不能確認的樣品棄去。
3、分組織提取總RNA;
4、RNA質(zhì)量檢測和控制;
5、測序法表達譜計數(shù);
6、數(shù)據(jù)庫搜索、測序計數(shù)拼接、計數(shù)和注釋;
7、不同處理結(jié)果對比
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