ta克隆的優(yōu)缺點(diǎn)
2個回答
我估計是與堿基互補(bǔ)配對有關(guān),我們老師說過
【TA 克隆的優(yōu)缺點(diǎn)】
1、優(yōu)點(diǎn):
(1)是目前克隆 PCR 產(chǎn)物最簡便、快捷的方法。
(2)不需使用含限制酶序列的引物,不需將 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行優(yōu)化,不需把 PCR 產(chǎn)物做平端處理,不需在 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物上加接頭,即可直接進(jìn)行克隆。
(3)TA克隆選擇靈活,如果一個位點(diǎn)不好使用,同一批質(zhì)粒還可以用其他酶再切,隨時可以擴(kuò)增。
(4)方便下游作業(yè),比如說要連接兩端PCR產(chǎn)物,先克隆會比較方便一些。
2、缺點(diǎn):
(1)PCR產(chǎn)物的酶切和判斷比較困難。
(2)另外酶切連接過程本身也相當(dāng)?shù)刭M(fèi)時費(fèi)力。
【TA 克隆】TA 克隆方法( Original TA Cloning Kit )即利用 Taq 聚合酶同時具有的末端連接酶的功能,在每條 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的 3` 端自動添加一個 3`-A 突出端。利用 TaKaRa 的 T 載體,直接高效地連接 PCR 產(chǎn)物。隨著基因組計劃的進(jìn)行,以及分子生物學(xué)技術(shù)、基因芯片技術(shù)在生命科學(xué)研究、生物工程和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用,對 TA 載體的需求量會逐步擴(kuò)大。
1、優(yōu)點(diǎn):
(1)是目前克隆 PCR 產(chǎn)物最簡便、快捷的方法。
(2)不需使用含限制酶序列的引物,不需將 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行優(yōu)化,不需把 PCR 產(chǎn)物做平端處理,不需在 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物上加接頭,即可直接進(jìn)行克隆。
(3)TA克隆選擇靈活,如果一個位點(diǎn)不好使用,同一批質(zhì)粒還可以用其他酶再切,隨時可以擴(kuò)增。
(4)方便下游作業(yè),比如說要連接兩端PCR產(chǎn)物,先克隆會比較方便一些。
2、缺點(diǎn):
(1)PCR產(chǎn)物的酶切和判斷比較困難。
(2)另外酶切連接過程本身也相當(dāng)?shù)刭M(fèi)時費(fèi)力。
【TA 克隆】TA 克隆方法( Original TA Cloning Kit )即利用 Taq 聚合酶同時具有的末端連接酶的功能,在每條 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的 3` 端自動添加一個 3`-A 突出端。利用 TaKaRa 的 T 載體,直接高效地連接 PCR 產(chǎn)物。隨著基因組計劃的進(jìn)行,以及分子生物學(xué)技術(shù)、基因芯片技術(shù)在生命科學(xué)研究、生物工程和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用,對 TA 載體的需求量會逐步擴(kuò)大。
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